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牛副流感病毒型PCR檢測試劑盒規(guī)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:AIF檢測試劑盒 DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體(抗原)E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人頭瘤病毒16型E7蛋白抗原
產(chǎn)品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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產(chǎn)品名稱 | 牛副流感病毒型PCR檢測試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | Bovine Parainfluenza Virus 3(BPIV3)3RTPCR |
貨號 | LZP6496 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
D-丙氨醇保存Anti-LRIG1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
L-天冬氨酸保存Anti-LRIG3 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
DL-胱氨酸保存Anti-LRP5 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
DL-異亮氨酸價格Anti-LRP1 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
L-苯甘氨酸實驗步驟Anti-LRP6 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
BOC-L-蘇氨酸保存Anti-LRPPRC Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
BOC-L-色氨酸實驗步驟Anti-LRRC32 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
D-纈氨酸使用說明書Anti-LRRK2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
FMOC-L-纈氨酸保存Anti-LSM2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
CBZ-D-纈氨酸實驗步驟Anti-LSM5 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
?DL-組氨酸價格Anti-LRTOMT Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
DL-絲氨酸使用說明書Anti-LSM7 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
L-甘-甘-甘三肽實驗步驟Anti-LTA Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 細胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
酪胺鹽酸價格Anti-LSM8 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
D-2-氨基丁酸實驗步驟Anti-LTA Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
紅色氧化鉛Red lead oxideAR500g
E811-100GL-Leucine L-亮安酸 (白安酸)61-90-5100g39
0657-5G2-Deoxy-D-Ribose 2-脫氧-D-核糖533-67-55g
中性紅染色液100ml
Monensin, wo7ium Salt1g
正己烷n-HexaneGCS2ml
SM1521Limits 8000bp DNA Fragment176
0422-10GTetracyclin,xy7chloride 鹽酸四環(huán)素64-75-510g
Cytochalasin B, Helminthosporium dematioideum
β-Galactosidase, Escherichia coli1KU
大鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒 ,英文名: ypsin ELISA Kit
人抗胃壁細胞抗體(AGPA/PCA)ELISA檢測試劑盒Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISAKit 96T/48T
大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)免疫試劑盒 Rat Alpha 2 Heremans Schmid Glycoprotein,AHSG ELISA Kit
CLIAKitforST(HumanSerotonin)ELISAKit人血清素/血清胺規(guī)格:48T/96T
人血液補體蛋白C4免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
人抗IgE受體抗體ELISAKit人抗IgE受體抗體ELISAKit,48T/96T人抗IgE受體抗體ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T
牛副流感病毒型PCR檢測試劑盒規(guī)格人支氣管上皮細胞,HBECTR細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
人直腸成纖維細胞,HRFCP細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
人內(nèi)膜上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
人平滑肌細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔Ⅱ型肺泡上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔B淋巴細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶