?
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
DEPC 100mL說明書Anti-EIF4E Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 轉錄調節(jié)因子  

RNase-free 1mL多少錢Anti-EIF4EBP1 Antibody研究領域  細胞生物 染色質和核信號 神經生物學 轉錄調節(jié)因子 表觀遺傳學  

非凍型血液 DNA 保存液250mL多少錢Anti-EIF4B Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導  

豬肺炎支原體抗體（MP-Ab）elisa試劑盒Anti-EIF4G1 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 細胞分化 表觀遺傳學  

小鼠嗜酸性粒細胞過氧化物酶（EPO）elisa試劑盒Anti-EIF4E3 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 細胞骨架 表觀遺傳學  

小鼠巨噬細胞炎性蛋白2（MIP-2）elisa試劑盒Anti-EIF4E3 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 細胞膜受體 細胞粘附分子 結合蛋白  

小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）elisa試劑盒Anti-EIF5A Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學  

小鼠β-防御素1 elisa試劑盒Anti-EIF5A Antibody研究領域  細胞生物 發(fā)育生物學 神經生物學 信號轉導 激酶和磷酸酶  

小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M（β2-GP1 IgA/G/M）elisa試劑盒Anti-EIF5A2 Antibody研究領域  免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶 細胞類型標志物  

兔β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）elisa試劑盒Anti-EIF5B Antibody研究領域  心血管 細胞生物 免疫學 神經生物學 信號轉導 干細胞  

兔p物質（SP）elisa試劑盒Anti-ELAC2 Antibody研究領域  腫瘤 心血管 免疫學 神經生物學 信號轉導 干細胞 細胞骨架 脂蛋白 新陳代謝 細胞外基質  

人白三烯B4（LTB4）elisa試劑盒Anti-ELAVL2 Antibody研究領域  心血管 免疫學 神經生物學 信號轉導 合成與降解  

人Syndecan-3/（SDC3）elisa試劑盒Anti-ELL Antibody研究領域  腫瘤 信號轉導 腫瘤細胞生物標志物 線粒體  

人EB病毒IgA（EBv IgA）elisa試劑盒Anti-ELF4 Antibody研究領域  腫瘤 免疫學 染色質和核信號  

人11去氫血栓烷B2（11-DH-TXB2）elisa試劑盒Anti-ELK1 Antibody研究領域  腫瘤 腫瘤細胞生物標志物  

*磺酸鋇  龍涎  2-溴噻吩

2'-羥基-3-苯基苯丙  α-異-甲基紫羅  5-溴-2-基

2-溴  薄荷  5-溴-2-羥基嘧啶

甲基-3-溴吡嗪-2-羧酸甲酯  二氫茉莉  2-溴-3-羥基

Tetraethylammonium tetrafluoroborate  四乙基四硼酸銨  429-06-1

Pyridinium -4-sulphonate  4-磺酸  24057-28-1

4-Formylphenylboronic acid  4-甲酰苯硼酸  87199-17-5

O,O'-Dioctadecylpentaerythritol bis(phosphite)  抗氧劑 618  3806-34-6

大鼠脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)ELISA試劑盒 ，英文名： ATGL ELISA Kit

人抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA檢測試劑盒HumanPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T

大鼠表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒 Rat Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit

CLIAKitfoIMP-2ELISAKit大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2規(guī)格：48T/96T

全組織茜素紅(ALIZARIEDS)鈣染色試劑盒10次

ELISAKitIFA人抗內因子抗體規(guī)格：48T/96T
馬腺病毒PCR檢測試劑盒說明書防御素β2抗體3,6,19,23-Tetrahydroxy-12-ursen-28-oic acid中文名：別名：分子式：C30H48O6

雙氧化酶1/甲狀腺氧化酶1抗體Phlegmal C中文名：別名：分子式：C32H52O3

雙氧化酶成熟因子抗體Squalene-2,3-diol中文名：別名：分子式：C30H52O2

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶DCAMKL1抗體21-Episerratenediol中文名：別名：分子式：C30H50O2

唐氏綜合征細胞粘附分子抗體Methyl lycernuate A中文名：別名：分子式：C31H50O4