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鏈狀帶絳蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格上海聯(lián)祖生物相關產品:anti-Ku-Ab檢測試劑盒 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。
產品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 鏈狀帶絳蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | Taenia soliumPCR |
貨號 | LZP7364 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Torachrysone 8-O-glucoside異戊酸 Standard for GC, ≥99.5% (GC)甲基三乙氧基硅烷 98%
trans-2-Tridecene-1,13-dioic acid異戊酸 98%甲基*氧基硅烷 98%
Trichloro-1,4-dimethoxybenzene異丁 98%四甲基硅烷 NMR級
Tricine異丁 99%(GC)四甲基硅烷 99%
Tricosaic acid異丁 Standard for GC,>99%(GC)1,1,3,3-四甲基二硅氧烷 98%
Tyrosol5-壬酮 98%1,3-二乙烯基-1,1,3,3-四甲基二硅氮烷 97%
Vanillyl alcohol2-壬酮 99%3-羥基苯甲 97%
vibo-Quercitol2-辛酮 98%5ˊ-尿苷酸二鈉 99%
Vitamin D3仲戊 standard for GC, ≥99.5% (GC)蚯蚓纖溶酶(蚓激酶) 大于12000u/mg
Xanthiazone仲戊 98%TPCK-胰蛋白酶 BAEE >10000 Unit/mg
Xanthiside2-戊酮 standard for GC, ≥99.5% (GC)磷酸鋅 AR
Xylitol2-戊酮 99%聚乙二單甲 平均分子量500
(Z)-Butylidenephthalide2-戊酮 分析標準品,用于環(huán)境分析,≥99.8% (GC)油酸山梨酯(司班80) 藥用級
Zeaxanthin2-戊酮 for HPLC, 99.0%吐溫80 藥用級
(1S)-(+)-Menthyl chloroformate3-戊酮 Standard for GC, ≥99.5% (GC)氯乙酰氯 98%
2,2,5,5-Tetramethylcyclohexane-1,4-dione3-戊酮 98%3,4-二羥基苯甲 98%
苊(標準品)SirT3 (C73E3) Rabbit mAbPHKB 磷酸化酶β抗體
鋁標準溶液(1000μg/ml,介質:1.0 mol/L H3)α-Synuclein Antibody (IF Preferred)PHKA1 磷酸激酶α1抗體
鋁標準溶液(100µg/mL,基體:5%HCl)Bcl-2 (124) Mouse mAb (PE Conjugate)phgophs-ATG4C(Ser451) 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體
苯甲(標準品)Rpb1 CTD (4H8) Mouse mAbphgophs-ATG4C(Ser398) 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體
鄰苯二甲酸二丁氧基乙酯(標準品)Atg5 Antibodyphgophs-ATG4C(Ser177) 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體
三聚酸(標準品)Phospho-Rpb1 CTD (Thr4) (D7L9W) Rabbit mAbPHGDH 磷酸甘油酸脫氫酶抗體
(+/-)-兒茶精(標準品)Atg7 AntibodyPHF8 組蛋白賴氨酸去甲基化酶PHF8抗體
鄰苯二甲酸二庚酯(標準品)Atg7 AntibodyPHD3 脯氨酸羥化酶抗體
反油酸(標準品)MYPT1 AntibodyPHD2 脯氨酸羥化酶2抗體
十七碳酸(標準品)MYPT1 AntibodyPHD1/prolyl hydroxylase 脯氨酰羥化酶抗體
鏈狀帶絳蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格1-Methoxynaphthalene,98%通用試劑 25G
Dodecyl Methyl Sulfide,98%通用試劑 5G
Dipropyl sulfide,≥97%通用試劑 5G
Furfuryl methyl sulfide,≥97%通用試劑 5G
Difurfuryl sulfide,98%通用試劑 5G
2,3-Difluoroanisole,97%通用試劑 1G
(3-Bromopropoxy)-tert-butyldimethylsil...通用試劑 5ML
Benzyl 3-bromopropyl ether,98%通用試劑 1G
Benzyl 2-bromoethyl ether,97%通用試劑 1G
Ethylene glycol mohexyl ether,≥99.0%通用試劑 25ML
Ethylene Glycol Mo-tert-butyl Ether,...通用試劑 100ML
2-Propoxyethal,99.4%通用試劑 500ML
Methyl isoeugel,≥98%通用試劑 25ML
beta-Naphthol ethyl ether,≥99%通用試劑 25G
Methyleugel,≥98%通用試劑 25ML