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流行性腮腺炎病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA Kit*人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA Kit*小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CR
產(chǎn)品分類
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1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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產(chǎn)品名稱 | 流行性腮腺炎病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7668 |
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
春雷霉素;春日霉素; 克死霉SSTR1 Antibody6-靛紅
土拉霉素A,托拉菌素A,泰拉霉素WBP2 Antibody靛紅
土拉霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品)USP8 (D18F6) Rabbit mAb氨基丁縮二
拉氧頭孢鈉FGF Receptor 2 (D4H9) Rabbit mAb2-甲基-6-喹啉羧酸
原花青素Cell Fractionation Antibody Sampler Kit2-溴-5-甲氧基酚
原花青素(標(biāo)準(zhǔn)品)HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb (Magnetic Bead Conjuga)肼鹽酸鹽
胡椒GST (26H1) Mouse mAb (Magnetic Bead Conjuga)鄰酰氨基對酚
胡椒(標(biāo)準(zhǔn)品)Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Magnetic Bead Conjuga)對
紐莫康定B0(肺囊康定) PAX5 (D19F8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)甲基-2-酸酯
福莫特羅 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjuga)甲酸正戊酯
溴甲后馬托品Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjuga)1-CBZ-哌啶酸
酸阿比特龍酯PhosphoPlus® EGFR (Tyr1068) Antibody Duet5-溴-8-硝基異喹啉
溴莫尼定 PSMA2 (D3A4) Rabbit mAb鄰三氟甲氧基
磺草靈Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb (PE Conjuga)羥基哌啶鹽酸鹽
磺草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)NBC1/SLC4A4 AntibodyN-甲基對甲磺酰
磺酸貝托司汀Phospho-GIT2 (Tyr392) (D8N9A) Rabbit mAb2,6-二-
葉綠素銅鈉鹽Upf2 (D3B10) Rabbit mAb2-氟-5-
新綠原酸(標(biāo)準(zhǔn)品)UBE2S (D5H9H) Rabbit mAb鄰溴三氟甲氧基
DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)ELISA試劑盒CSP 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)100 ul
DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒C-SKI/v-SKI C-SKI100 ul
DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒Calcitonin 降鈣素100 ul
C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒Calcitonin 降鈣素100 ul
C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒CTBP1 C端結(jié)合蛋白1100 ul
C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒CT DNA (calf thymus DNA) 小牛胸腺DNA 1 Kit
CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒CTGF 結(jié)締組織生長因子100 ul
CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒CD150/SLAM 信號淋巴細(xì)胞活化分子CD150100 ul
CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒CD151/MER2/PETA-3 CD151100 ul
流行性腮腺炎病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格人強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒英文名稱:Human dyrphin,Dyn ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks,OH-PYD ELISA Kit*
人羥賴氨酸(Hyl)ELISA試劑盒英文名稱:Human hydroxylysine,Hyl ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒英文名稱:Human hydroxyproline,Hyp ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA Kit*
人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA Kit*小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠補體因子H(CFH)ELISA試劑盒 組裝/原裝