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一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!
英文名稱 Anti-Cyclin B3
中文名稱 周期素B3抗體說(shuō)明書
別 名 CCNB 3; CYCB3; G2/mitotic specific cyclin B3.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 細(xì)胞周期蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 158kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Cyclin B3
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無(wú)熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽(yáng)性。
Shisa同源物5(SHISA5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-NS5A稻梨孢節(jié)裂小茴香
分離蛋白2(SCRN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-NS4B赤霉菌青黛
分離蛋白3(SCRN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-NS4A核黃素德沃斯氏菌脫蘇氨醇8奧曲肽
信號(hào)素3G(SEMA3G)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-NS3豇豆慢生根瘤菌鹽酸左旋咪唑雜質(zhì)
磷脂酶D6(PLD6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克隆);CHO-HCV-NS2蘇云金芽孢桿菌吡哌酸
Embigin蛋白(EMB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-p7土壤伯克氏菌重去甲腎上腺素
核糖核酸外切酶2(ERI2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-E2黑曲霉醋酸甲地孕酮
筑絲蛋白4(TEKT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-E1亮白曲霉豆腐果苷
皮質(zhì)素2(CTXN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-C黃曲霉醋酸鈉
皮質(zhì)素3(CTXN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢;TPO-CHO-I黃色毛霉決明子LAMP鑒定試劑盒
防御素β133(DEFβ133)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢系;pDSr a2-mpl-X小紅酵母大鼠甲狀旁腺激素(PTH) Elisa測(cè)定試劑盒
葡糖酸激酶(GNTK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163香栓菌3-磷酸甘油醛脫氫酶(大鼠、小鼠)IHC WB
烯化酶4(ENO4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1少根根霉原變種KB抑制蛋白α抗體流式免疫組化
YY肽3(PYY3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA芽孢桿菌粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體流式免疫組化
Ropporin 1B蛋白(ROPN1B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(亞系克?。籆HO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA枯草芽孢桿菌蛋白抗體流式免疫組化
周期素B3抗體說(shuō)明書大鼠環(huán)指蛋白4(RNF4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒人胚惡性畸胎瘤Anti-ERCC1/FITC 熒光素標(biāo)記抗切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1抗體IgG
大鼠腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒人平滑肌肉瘤Anti-ERK1/ERK /FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶1抗體IgG
大鼠Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒前列腺癌Anti-p-ERK1/p-MAPK-1/2 /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG
大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A11 (S100A11) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒膀胱癌Anti-ERK1/2/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG
大鼠S100鈣結(jié)合蛋白B (S100B) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒耐DDP鼻咽癌胞,1μg/mlAnti-Eph receptor B2/FITC 熒光素標(biāo)記Eph receptor B2抗體IgG
大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A6 (S100A6) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒鼻咽癌Anti-ER- Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記雌激素受體α抗體IgG
大鼠脂肪酸結(jié)合蛋白3(FABP3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒轉(zhuǎn)lmpl基因鼻咽癌Anti-ER-alpha/FITC 熒光素標(biāo)記雌激素受體抗體IgG
大鼠高密度脂蛋白膽固(HDL-C)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒SUNE-1亞株9-4EAnti-ER- Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記雌激素受體α抗體IgG