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樣品準(zhǔn)備:1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5
產(chǎn)品分類
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1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
服務(wù):
公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
FABP-4脂肪酸結(jié)合蛋白4ELISA試劑盒 | FABP-4 ELISA Kit | 48T/96T | LZ-E028610 |
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
成骨生長(zhǎng)肽(OGP)試劑盒 櫻草素氫氧化鋇,八水 ACS, 98% 對(duì)乙苯 97%
成骨生長(zhǎng)肽(OGP)試劑盒 鷹嘴豆芽素A鎂 AR,99.5%2-乙氧苯 98%
破骨分化因子(ODF)試劑盒 硬飛燕草2,2-偶氮二異丁 98%3-乙氧苯 98%
破骨分化因子(ODF)試劑盒 硬脂酯對(duì)溴苯 99%5-氟-2-氧苯 97%
羥膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)試劑盒 油對(duì)溴苯乙 98%5-呋喃-2- 97%
羥膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)試劑盒 油酯碳鋇 ACS5--2-噻吩 97%
脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)試劑盒柚皮二氧化錳 AR,85%5-氟-2- 98%
脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)試劑盒柚皮二氫查爾二氧化錳 GR,91%4-氟-2- 97%
膠原吡啶交聯(lián)(PYD)試劑盒 柚皮素8-氨喹啉 98%4-氟-3- 99%
膠原吡啶交聯(lián)(PYD)試劑盒 柚皮素-7-O-葡萄糖6-氨喹啉 98%2-酰苯 98%
葡萄球菌蛋白A(SPA)試劑盒 柚皮素查爾 6-喹啉 98%3-酰苯 97%
葡萄球菌蛋白A(SPA)試劑盒 右旋四氫巴馬汀8-喹啉 99%2-氟苯 98%
刀豆素A(ConA)試劑盒 魚藤素7-喹啉 97%3-氟苯 97%
刀豆素A(ConA)試劑盒 羽扇豆7-喹啉 75%2-氟聯(lián)苯-4- 97%
游離原卟啉(FEP)試劑盒 羽扇烯5-硝喹啉 98%3-氟-4-苯 98%
游離原卟啉(FEP)試劑盒 玉米黃素2-氨苯酰 98%3-氟-5-三氟 97%
FABP-4脂肪酸結(jié)合蛋白4ELISA試劑盒NF-κB是一個(gè)多向性核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,可調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、趨化因子、粘附分子、生長(zhǎng)因子、免疫受體、氧化應(yīng)激相關(guān)酶、轉(zhuǎn)錄因子、急性時(shí)相蛋白等基因的表達(dá),功能涉及相應(yīng)的許多生理、病理過程。
DAPI 是一種藍(lán)色核染料,優(yōu)先染dsDNA,DAPI 表現(xiàn)為可集中結(jié)合在DNA 雙鏈的AT 小溝,結(jié)合后的DAPI 熒光會(huì)發(fā)生20倍增強(qiáng)。同時(shí),DAPI 也可以結(jié)合RNA,與DNA 不同,一般認(rèn)為DAPI 結(jié)合于RNA 的AU 區(qū)。DAPI/RNA 的復(fù)合體(500nm)有比DAPI/dsDNA 復(fù)合體(460nm)更長(zhǎng)的熒光波長(zhǎng)。DAPI 是一種常用的多色熒光技術(shù)中的核復(fù)染劑。
NF-κβ作為一種廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子,被激活由胞漿轉(zhuǎn)入胞核,從而參與炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、腫瘤發(fā)生等??梢詫⒓?xì)胞核和NF-κβ分別用DAPI 和FITC 染色,F(xiàn)lowSight 可觀察每個(gè)細(xì)胞是否發(fā)生NF-κβ核轉(zhuǎn)位,并量化分析NFkB 核轉(zhuǎn)位程度以及發(fā)生核轉(zhuǎn)位細(xì)胞的比例。
儲(chǔ)存:4℃避光,有效期12個(gè)月。